LABURPENA ETA AZALPENA PROBA
Malaria eltxoek transmititutako gaixotasun hemolitiko eta sukar bat da, 200 milioi pertsona baino gehiago kutsatzen dituena eta urtean milioi bat pertsona baino gehiago hiltzen dituena.Plasmodium lau espeziek eragiten dute: P. falciparum, P. vivax, P. ovale eta P. malariae.Plasmodio hauek giza eritrozitoak infektatzen eta suntsitzen dituzte, hotzikarak, sukarra, anemia eta esplenomegalia sortuz.P. falciparum-ek beste plasmodio-espezieek baino gaixotasun larriagoak eragiten dituzte eta paludismoaren heriotza gehien eragiten dute.P. falciparum eta P. vivax dira patogeno ohikoenak, hala ere, espezieen banaketan desberdintasun geografiko handia dago.
Tradizionalki, paludismoa diagnostikatzen da Giemsa-ko odol periferikoko lohi lodietan tindatutako organismoen erakustaldiari esker, eta plasmodium espezie desberdinak infektatutako eritrozitoetan agertzeagatik bereizten dira1.Teknika diagnostiko zehatza eta fidagarria egiteko gai da, baina mikroskopista trebeek zehaztutako protokoloak2 erabiliz egiten dutenean soilik, eta horrek oztopo handiak ditu munduko eremu urrun eta pobreentzat.
Malaria Pf / Pan Antigen Fast Test Kit oztopo hauek konpontzeko garatu da.Testak P. falciparum proteina espezifikoaren aurkako antigorputz monoklonal eta poliklonal pare bat erabiltzen ditu, Histidine Repeat Protein II (pHRP-II), eta plasmodium Lactate Dehydrogenase (pLDH) antigorputz monoklonal pare bat, plasmodioaren lau espeziek ekoitzitako proteina, eta, beraz, P. falcipa in aldi berean detektatzeko eta beste edozein plasmodiaren desberdintzea ahalbidetzen du.Prestakuntzarik gabeko edo gutxieneko trebetasunik gabeko langileek egin dezakete, laborategiko ekipamendurik gabe.
PRINTZIPIOA
Pf/ Pan Malaria Fast Test kit alboko fluxu kromatografikoko immunoensayo bat da.Proba-banden osagaiak honako hauek dira: 1) Borgoina koloreko konjotu-kostina bat, saguaren aurkako pHRP-II antigorputza urre koloidearekin konjokatua (pHRP II-urre konjokatuak) eta saguaren aurkako pLDH antigorputza urre koloidearekin konjokatua (pLDH-urre konjokatuak),
2) bi proba-banda (Pan eta Pv bandak) eta kontrol-banda bat (C banda) dituen nitrozelulosa-mintz-banda.Pan-banda pLDH-ren aurkako antigorputz monoklonalez estalita dago, eta horren bidez, lau plasmodio-espezieetako edozein infekzioa detektatu daiteke, Pf banda anti-pHRP-II antigorputz poliklonalez estalita dago Pf infekzioa detektatzeko eta C banda ahuntz-saguaren aurkako IgGz estalita dago.
Saiakuntzan zehar, odol-laginaren bolumen egoki bat proba-kasetearen lagin-putzuan (S) banatzen da, lisi-buffer bat gehitzen da tampon-putzuan (B).Bufferak globulu gorriak lisatzen dituen eta hainbat plasmodio-antigeno askatzen dituen detergente bat dauka, kasetean dagoen tiran zehar ekintza kapilar bidez migratzen dutenak.pHRP-II laginean aurkezten bada pHRP II-urrezko konjokatuekin lotuko da.Ondoren, immunokonplexua mintzean harrapatzen dute aurrez estalitako pHHRPIIren aurkako antigorputzek, Borgoina koloreko Pf banda bat osatuz, Pf probaren emaitza positiboa adieraziz.pLDH alean aurkezten bada pLDH urrezko konjokatuekin lotuko da.Ondoren, immunokonplexua mintzean harrapatzen da aurrez estalitako pLDHren aurkako antigorputzak, Borgoina koloreko Pan banda bat osatuz, plasmodiumeko probaren emaitza positiboa adieraziz.Pan bandarik ezean, beste hiru plasmodioetako edozein probaren emaitza positiboa gomenda daiteke.
Test-bandarik ez egoteak (Pan eta Pf) emaitza negatiboa iradokitzen du.Probak barne-kontrol bat dauka (C banda), zeinak ahuntzaren aurkako saguaren IgG / saguaren IgG (pHRP-II eta pLDH-urrezko konjokatuak) immunokonplexuaren borgoña koloreko banda erakutsi beharko lukeena, proba-bandetako edozein kolore-garapena kontuan hartu gabe.Bestela, probaren emaitza baliogabea da eta lagina beste gailu batekin berriro probatu behar da.
